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8-27
細胞培養常規方法1.凍存細胞的復蘇應遵守慢凍快融的原則。先將水浴鍋調至37-37。5度，取出凍存的細胞迅速放入后將細胞面浸至水面以下不斷搖動至融化。在無菌臺內將*培養基加入50ml的小培養瓶內，約5ml左右，然后用無菌吸管從凍存管內取出細胞，置培養并內輕輕搖晃，使細胞均勻后置培養箱內培養。2.傳代:對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基，吸的越干凈越好，以免中和后加入的消化液，使強度減弱（或PBS洗1－3次）。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml，按此比例進行消化，(根據經驗)，晃...
7-2
人體細胞是人體結構和生理功能的基本單位，是生長、發育的基礎。人體細胞形態多樣,有球形、方形、柱狀形等。其大小差異很大,大多數細胞直徑僅有幾個微米,有的可達到100微米以上。盡管細胞的形態、大小各異,但其結構基本相同。人體細胞約有40萬億—60萬億個，細胞的平均直徑在5—200微米之間。除成熟的紅血球和血小板外，所有細胞都至少有一個細胞核，是調節細胞生命活動、控制分裂、分化，遺傳，變異的控制中心。人體由體細胞和生殖細胞組成：人體細胞初由1個成熟受精卵細胞開始,分裂為2個細胞,繼...
6-30
建議在無菌條件下采用下列方法進行恢復培養。方法一:1、用浸過75%酒精的脫脂棉團擦凈安瓿表面。2、待安瓿表面酒精揮發后，將安瓿的封口端移至酒精燈火焰上加熱。3、用無菌水滴至加熱的安瓿頂端使玻璃破裂。4、用無菌鑷子敲開安瓿頂端。5、用無菌吸管加入0、3～0、5ml的液體培養基于安瓿管內，使凍干菌種溶解呈懸浮液。6、混勻后，將懸浮液移植于液體培養基中或固體瓊脂上，在適宜溫度等條件下培養。方法二:1、用三棱鋼銼在封口下約2cm處橫銼安瓿。2、用浸過75%酒精的脫脂棉團擦凈安瓿表面。...
6-28
1冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后，須立即放入37°C水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。2細胞冷凍管解凍培養時，是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對DMSO敏感之細胞外，絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞)，在解凍之后，應直接放入含有10-15ml新鮮培養基之培養角瓶中，待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解凍后細胞無法生長或貼附...
6-15
標準菌株是屬于種屬鑒定的規范參照菌，而質控菌株，往往是從功能或用途上講的，通常是以標準菌株用來做質控的。標準菌株使用注意事項：1、選擇合適的培養基：勿使用選擇性培養基。一般使用非選擇性的增菌培養基，因為微生物在選擇性培養基中生長某些生物特性可能丟失，保藏的菌種的生物特性可能與標準菌株特性不同。2、菌液的濃度：菌液的濃度一般越大，菌種保存時間越長。保藏時細菌常使用菌液，霉菌常用無菌水或生理鹽水制備成的孢子懸液。3、甘油濃度：甘油終濃度一般為10%~20%。由于甘油原液太粘稠，需...
6-15
菌種是從事微生物學及生命科學研究的基本材料，在醫學領域中，診斷制品的制備，菌苗的生產、微生物致病性研究。1、梭氏法將容有1滴細胞懸液的小管﹐置于盛有氫氧化鉀或五氧化二磷吸水劑的大試管中﹐用真空泵抽至1、3帕時﹐將大試管密封保存。這是為減少細胞死亡率而采取的一種不經凍結﹑緩慢脫水的干燥保藏法﹐適用于多種細菌﹑真菌。2、冷凍真空干燥法將細胞懸液每0、1~0、2毫升注入一無菌安瓿瓶﹐于-40℃預凍1小時﹐再于-20~30℃﹑真空度為13、3帕的條件下脫水。在脫水過程后期﹐安瓿瓶外溫...
4-20
所有體外培養細胞，包括初代培養及各種細胞系，當生長達到一定密度后，都需做傳代處理。傳代的頻率或間隔與培養液的性質、接種細胞數量和細胞增殖速度等有關。接種細胞數量大、細胞基數大、相同增殖速度條件下，細胞數量增加與飽和速度相對要快（實際上細胞接種數量大時細胞增殖速度比稀少時要快）。連續細胞系和腫瘤細胞系比初代培養細胞增殖快，培養液中血清含量多時細胞增殖比少時快。以上情況都會縮短傳代時間。所謂細胞“一代”一詞，系僅指從細胞接種到分離再培養時的一段時間，這已成為培養工作中的一種習慣說...
4-11
細胞株和細胞系的區別，列表說明我來答這么龍厄爾尼諾LV.12019-02-24聊聊細胞株和細胞系的區別：一、概念不同1、細胞株：細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物稱為細胞株（CellStrain）。2、細胞系：細胞系（cellline）指原代細胞培養物經*傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續傳代的培養細胞。二、形成方法不同1、細胞株：通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物的培養物成為細胞株。...
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