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細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)影響生長(zhǎng)的幾點(diǎn)因素細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng),失去了機(jī)體的調(diào)節(jié)和控制,因此,除滿足營(yíng)養(yǎng)的要求外,還必須使細(xì)胞生存環(huán)境晝接近活體的環(huán)境.外環(huán)境的培養(yǎng)條件如溫度、滲透壓、酸堿度等均能影響細(xì)胞的生長(zhǎng).一、溫度：一般哺乳類及禽類細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度是37~38℃.溫度過高或過低都會(huì)影響到細(xì)胞的生長(zhǎng).細(xì)胞耐受低溫的能力比抗熱的能力強(qiáng),在低溫下,細(xì)胞的代謝活力及核分裂降低.溫度低于0℃時(shí),雖影響細(xì)胞代謝,但并無傷害作用.把細(xì)胞置于23~25℃時(shí),細(xì)胞仍能生存和生長(zhǎng),但速度減...
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什么時(shí)候需要穩(wěn)定細(xì)胞株？以下實(shí)驗(yàn)，構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞株而不是瞬時(shí)轉(zhuǎn)染更能滿足實(shí)驗(yàn)要求：1)外源片段在分裂細(xì)胞中長(zhǎng)期(2周)穩(wěn)定表達(dá)。雖然普通轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)一般只能保證2-4天的轉(zhuǎn)染和表達(dá)效率，但腺病毒載體在多數(shù)分裂細(xì)胞中可以維持2-4周內(nèi)的高轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)周期。而非分裂細(xì)胞，可以使用腺相關(guān)病毒載體轉(zhuǎn)導(dǎo)外源基因，因?yàn)橄傧嚓P(guān)病毒載體在許多非分裂細(xì)胞中可以保持長(zhǎng)達(dá)1年的高效表達(dá)。2)需要構(gòu)建使用誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)，這主要是由于：a)過表達(dá)基因或者干擾目的基因引起細(xì)胞毒性或者抑制細(xì)胞生長(zhǎng)等不利因素;b...
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細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)（入門級(jí)）總的原則：無菌操作、保證細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定性按時(shí)間順序整理1、細(xì)胞房和生物安全柜（或超凈工作臺(tái)）先開紫外照射30min。作用：對(duì)環(huán)境滅菌（空氣）。（備注：如果著急，至少也要開15分鐘）在做實(shí)驗(yàn)之前考慮好需要哪些物品。開始照射之前，將所需要用到的物品都放到生物安全柜（或超凈工作臺(tái)）里面。常用移液槍或電動(dòng)移液器等，需要在工作臺(tái)上放置一套設(shè)備。細(xì)胞培養(yǎng)箱一般都已經(jīng)調(diào)整好。定期留意一下二氧化碳是否足夠。不夠及時(shí)更換。2、顯微鏡需要定期消毒酒精擦拭。注意：顯微...
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細(xì)胞養(yǎng)不好？那可能是這些沒注意到位1、購(gòu)買的細(xì)胞死亡或存活率不佳可能原因？細(xì)胞冷凍管解凍后，為何會(huì)有細(xì)胞數(shù)目太少的情形？研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳，常見原因可歸納為：培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳；血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳；解凍過程錯(cuò)誤；冷凍細(xì)胞解凍后，加以洗滌細(xì)胞和離心；懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞；培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤；細(xì)胞置于–80℃太久。研究人員在冷凍細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少，大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤，造成細(xì)胞的物理性損傷，以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻...
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細(xì)胞株在生物制藥中使用非常廣泛，細(xì)胞株培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單，貼壁強(qiáng)度適中，比較容易轉(zhuǎn)染，很適合用它來研究一般哺乳動(dòng)物基因的功能。細(xì)胞培養(yǎng)過程中的污染不僅僅指微生物，而且還包括所有混入培養(yǎng)環(huán)境中的、對(duì)細(xì)胞生存有害或造成細(xì)胞不純的物質(zhì)，包括生物和化學(xué)物質(zhì)。細(xì)胞株的篩選我們要注意加藥時(shí)間以及維持濃度：1.由于基因轉(zhuǎn)染到細(xì)胞內(nèi)之后要一段時(shí)間才能表達(dá)出蛋白質(zhì)。所以細(xì)胞株篩選時(shí)不能太早;但是也不能太晚，因?yàn)檗D(zhuǎn)染了外源基因的細(xì)胞代謝負(fù)荷較大，增值較慢，時(shí)間長(zhǎng)了就會(huì)被沒有外源基因轉(zhuǎn)入的細(xì)胞所淹沒，終...
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質(zhì)控菌株本質(zhì)上是標(biāo)準(zhǔn)菌株的商業(yè)衍生產(chǎn)品，其應(yīng)有可靠的溯源證明追溯至其使用的標(biāo)準(zhǔn)菌株來源，在微生物實(shí)驗(yàn)室僅可作為工作菌株進(jìn)行使用，在使用前也應(yīng)進(jìn)行特性和純度的確認(rèn)。質(zhì)控菌種基本上分為兩類：第一種滿足低濃度接種量的要求，細(xì)菌含量一般小于100cfu，這是各種微生物培養(yǎng)基促生長(zhǎng)試驗(yàn)、微生物陽性對(duì)照試驗(yàn)的接種量要求，無菌工藝模擬試驗(yàn)中培養(yǎng)基的靈敏度檢測(cè)、無菌或微生物限度檢查實(shí)驗(yàn)方法驗(yàn)證等。為了滿足高濃度接種的需要，其他種類的細(xì)菌含量一般為105-106cfu。是對(duì)防腐劑、抑菌劑、消毒...
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結(jié)腸癌細(xì)胞株延伸出早期結(jié)腸癌治療方法結(jié)腸癌起病隱匿，早期的癥狀不是很明顯，主要有大便習(xí)慣改變、便次增多或無原因的粘液、膿血便、原因不明的低燒、盜汗、貧血等。出現(xiàn)結(jié)腸癌癥狀時(shí)要及時(shí)去醫(yī)院進(jìn)行詳細(xì)的檢查。1965年科研人員將人結(jié)腸癌與胰腺癌組織中提取到r細(xì)胞膜糖蛋白，并發(fā)現(xiàn)也存在于內(nèi)胚層衍生的消化道腺癌及2-6個(gè)月胚胎肝、腸及胰腺組織中，故而命名為CEA，且認(rèn)為屬于可特異地測(cè)定結(jié)腸癌，亦被后繼的工作證實(shí)。隨著腫瘤分子遺傳學(xué)的研究，體外基因擴(kuò)增技術(shù)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的發(fā)展與應(yīng)...
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關(guān)于ATCC的細(xì)胞,你需要知道的那些事兒ATCC以生命科學(xué)領(lǐng)域*知識(shí)的獲取，分類，匯總，完善進(jìn)而廣泛傳播為己任，以期為推動(dòng)生物原料，生物信息，生物技術(shù)，知識(shí)產(chǎn)權(quán)，規(guī)范等相關(guān)領(lǐng)域的前沿性、合法化、實(shí)用性發(fā)揮一定的作用。ATCC擁有目前zui大的、品種zui豐富的微生物、細(xì)胞系以及重組DNA原料，同時(shí)它也是科研工作者*的提供可靠的研究材料的供應(yīng)商。ATCC的成立可追溯到1925年，一個(gè)科學(xué)委員會(huì)認(rèn)識(shí)到科學(xué)研究對(duì)于微生物的大量需求而萌發(fā)了創(chuàng)建一個(gè)微生物相關(guān)制品供應(yīng)中心的想法。而今，...
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